Resumo Os quatro componentes de hemoglobina principais do hemolisado de Pterygoplichthys pardalis foram isolados e caracterizados. As propriedades funcionais investigadas para os componentes isolados compreendem o efeito de pH e ATP sobre: (i) o equilíbrio de O2, (ii) a cinética da dissociação de O2 (iii) a cinética da combinação de CO. O componente I, corresponde a aproximadamente 50% da hemoglobina total, é caracterizado por propriedades funcionais que são diferentes das dos componentes II, III e IV, os quais são semelhantes. Assim, é provado, uma vez mais, que componentes múltiplos num hemolisado caem na categoria de hemoglobinas caracterizadas por propriedades funcionais distintas e complementares.

Summary The four main hemoglobin components of the hemolysate of Pterygoplichthys pardalis have been isolated and characterized. The functional properties investigated for the isolated components comprise the effect of pH and ATP on (i) the O2 equilibrium, (ii) the O2 dissociation kinetics, (iii) the CO combination kinetics. Component I, corresponding to approximately 50% of the total hemoglobin, is characterized by functional properties which are distinctly different from those of Components II, III and IV, which are alike. Thus it is shown, once more, that multiple components in an hemolysate fall into categories of hemoglobins characterized by distinct and complementary functional properties.

Resumo Loricariichthys sp., um peixe aeróbico do rio Amazonas, tem um componente hemoglobinico principal. Estudos quantitativos na cinética de dissociação de O2 e combinação de CO a proteína foram efetuados por experimentos "stopped-flow" a diferentes valores de pH e uma concentração constante de 1,25 mM de ATP. A dissociação de oxigênio mostra um comportamento simples de 1.ª ordem e uma forte dependência de pH. Por outro lado, a cinética da combinação de CO foi homogênea e rápida a valores altos de pH, e lenta e claramente autocatalítica a valores de pH abaixo de 7,0.

Summary Loricariichthys sp., an air-breathing fish from the Amazon River has one major hemoglobin component. Quantitative studies on the kinetics of O2 dissociation and CO combination to the protein were performed by stopped-flow experiments at different pH values and a constant ATP concentration of 1.25 mM. The oxygen dissociation shows a simple first order behavior and a strong pH dependence. The CO combination kinetics, on the other hand, were homogeneous and fast at higher pH values and slow and clearly autocatalytic at pH values below 7.0.

Resumo O conteúdo em citocromo de partículas Keilin-Hartree isoladas de peixes respiradores de água e respiradores de ar facultativos é anotado o comparado com dados para mitocondrias de mamíferos. Medições cinéticas de "steady state" foram realizadas sobre o sistema de oxidase. Os resultados podem ser interpretados em termos de dois locais de ligação do citocromo C cineticamente significativos associados com o citocromo-oxidase com valores Km de ~1x10-6 e ~5x10-8 M. Estes valores são semelhantes aos encontrados em mitocondrias de boi (Ferguson-Miller et al, 1976), Os valores de "turnover" para os citocromo-oxidases de vários peixes são comparados, encontrando-se que são similares e próximos aos encontrados para a enzima de mamíferos. A constância do conteúdo de citocromo e os parâmetros cinéticos entre espécies sugerem que os processos respiratórios constituem um sistema conservador desde o ponto de vista evolutivo.

Summary The cytochrome content of Keilin-Hartree particles isolated from water-breathing and facultative air-breathing fishes is reported and compared with data for mammalian mitochondria. Steady state kinetic measurements were performed on the oxidase system. The results may be interpreted in terms of two, kinetically significant cytochrome c binding sites associated with cytochrome oxidase with Km values of ~1x10-6 and ~5x10-8M. These values are close to those reported for beef mitochondria (Ferguson-Miller et al 1976). The turnover numbers for the cytochrome oxidases from a variety of fishes are compared, and are found to be similar and close to the value found for the value found for the mammalian enzyme. The constancy of the cytochrome content and the kinetic parameters from species to species suggests that the cellular respiratory processes constitute a conservative system from the stand point of evolution.